2000年,郑丽媛作为四人女子跳舞团体Chakra的成员出道；同年,Chakra组合发行了首张专辑《14GuyProjectAlbum》。2001年,郑丽媛随组合发行专辑《Chakra"Ca》。2002年,郑丽媛随组合发行专辑《Chakra3》；同年,参演电影《紧急措施19号》。《我叫金三顺》剧照2003年,郑丽媛随组合Chakra发行专辑《Tomato》。2004年,郑丽媛正式宣布退出Chakra组合；同年,出演电影《B型男友》,在片中饰演一位女大学生。2005年,郑丽媛主演电视剧《你好!弗兰西斯卡》；同年,与吴志昊,金素妍合作出演MBC电视剧《秋天的骤雨》；同年,主演MBC电视剧《我叫金三顺》,在剧中饰演女二号柳熙珍,凭借该剧获得年度MBC演技大赏优秀演技奖。2006年,郑丽媛与金来沅合作主演MBC电视剧《你来自哪颗星》,在剧中饰演在小村落里长大,但是对生活积极的金福实。2007年,郑丽媛与奉太奎联袂主演爱情喜剧片《双面女友》,在片中饰演具有双重性格的安妮,凭借该片获得第28届韩国青龙电影奖最佳新人奖。2009年,郑丽媛主演女性题材的古装剧《王女自鸣鼓》,在剧中饰演女一号自鸣公主,因电视剧的收视率不尽人意,原定播出50集的《王女自鸣鼓》以39集为大结局落下了帷幕；同年,主演喜剧爱情片《金氏漂流记》,在片中饰演自闭症宅女。杂志画报2011年,郑丽媛主演反映朝鲜战争的人文关怀喜剧片《与敌同寝》,在片中饰演朴雪熙；同年,与权相佑合作出演情感剧情片《痛症》,饰演患有血友病的朱东贤。2012年,郑丽媛与严泰雄联袂主演爱情喜剧片《永无结局的故事》；同年,与李凡秀,郑糠云,洪秀贤合作主演SBS电视剧《工薪族楚汉志》；同年,主演电视剧《电视剧之王》。2013年,郑丽媛主演MBC电视剧《医学团队》,在剧中饰演胸部外科女医生徐珠英。2014年3月,郑丽媛担任真人秀节目《ArtStarKorea》的主持人。2015年10月,郑丽媛主演tvN月火剧《泡泡糖》,在剧中饰演电台PD金幸儿。2016年6月,郑丽媛联同一众志同道合好友参与《IAMADISCOVERER》海处艺术之旅；6月20日,郑丽媛获邀担任第15届MSFF实现影片电影节评审之一。2017年,郑丽媛与尹贤敏,全光烈携手出演KBS2TV月火剧《魔女的法庭》,在剧中饰演检察官马利盾。2018年2月,郑丽媛主演喜剧犯罪片《门》；5月,主演SBS爱情喜剧《油腻的浪漫》,在剧中饰演段赛雅；8月1日,郑丽媛宣布与经纪公司KEYEAST再度续约。2019年12月,郑丽媛与李善均合作主演JTBC政法题材电视剧《检察官内传》,在剧中饰演完美的精英检察官车明珠。2022年9月21日,郑丽媛与李奎炯共同主演Disney+犯罪悬疑剧《争锋相辩》,在剧中饰演为了成功总是不择手段的王牌律师卢善熙。2023年6月26日,韩国第二届青龙电视剧颁奖礼公布了提名名单,其中包括女主演奖郑丽媛。电影《金氏漂流记》电视剧《泡泡糖》电视剧《检察官内传》电视剧《魔女的法庭》
郑丽媛郑丽媛在《电视剧帝王》中热情和率真的表演打破了观众对她的固有印象,成功转为清纯型路线。郑丽媛在电影《痛症》中饰演一位血友病患者,她把这个角色诠释得十分到位。郑丽媛因出演电视剧《我叫金三顺》而人气上升。她笑容恬淡,微笑起来上扬的嘴角和深深的酒窝在观众心目中留下了美好的印象。在SBS连续剧《工薪族楚汉志》中,郑丽媛展现了精湛的演技,她在剧中饰演的白吕雉一角不仅受到很多男性观众的喜爱,还以独有的魅力受到女性观众的好评。